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सुदुर पराबैगनी (far- V) क्षेत्र में एक वृत्तीय द्विबर्णता वर्णक्रम एक प्रोटीन में द्वितीयक संरचनाओं के प्रकार तथा अंर्तवस्तु के बारे में सूचित करते हैं। निकट पराबैगनी (Near-UV) तथा ट्रिप्टोफान उत्सर्जन वर्णक्रम तृतीयक संरचना के बारे में सूचना प्रदान करते हैं। ऊपर प्रदर्शित चित्र पट्टिकाओं में (A) प्रोटीन 'X' का अंतस्थ प्रतिदीप्ती उत्सर्जन, (B) प्रोटीन 'X' का सुदुर पराबैगनी (Far-UV) CD वर्णक्रम, (C) विभिन्न परिस्थितियों में अभिलिखित प्रोटीन 'X' की निकट पराबैगनी (Near-UV) CD वर्णक्रम।

वक्रे प्रोटीन 'X' के वर्णक्रम को दर्शाते है pH 7.0 (काला) पर, pH 3.0 (हरा) पर, तथा 6.0 M गुआनिडिन हाइड्रोक्लोराइड की उपस्थिति में pH 7.0 (लाल) पर। प्रयोग क्या प्रतिवेदित करता है?

This question was previously asked in
CSIR-UGC (NET) Life Science: Held on (17 Feb 2022 Shift 1)
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  1. pH 7.0 पर प्रोटीन पूर्णतया वलित है, pH 3.0 पर अम्ल प्रेंरित द्रवित गोलिका तथा 6 M गुआनिडिन हाइड्रोक्लो राइड में अवलित
  2. pH 7.0 पर प्रोटीन द्वितीयक संरचना कम हो जाता है तथा अन्य दो परिस्थितियों में प्रोटीन के बीटा तन्तुकें बनाया
  3. प्रतिदीपि तथा निकट पराबैंगनी CD में परिवर्तन pH 3.0 पर तथा 6M गुआानिडिन हाइड्रोक्लोराइड में द्रवगतिकीय अर्धव्यास में वृद्धि को दर्शाता है
  4. 3.0 पर तथा 6M गुआानिडिल हाइड्रोक्लोराइड दोनों में प्रोटीन का अत्यधिक विकृतिकरण है

Answer (Detailed Solution Below)

Option 1 : pH 7.0 पर प्रोटीन पूर्णतया वलित है, pH 3.0 पर अम्ल प्रेंरित द्रवित गोलिका तथा 6 M गुआनिडिन हाइड्रोक्लो राइड में अवलित
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Detailed Solution

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अवधारणा:-

  • प्रोटीन की द्वितीयक संरचना, वलय और बंधन विशेषताओं का आकलन करने का एक त्वरित तरीका वृत्ताकार द्विवर्णता (CD) का उपयोग करना है।
  • सरल शब्दों में कहें तो वृत्ताकार द्विवर्णता, बायीं और दायीं ओर से आने वाले वृत्ताकार ध्रुवीकृत प्रकाश का असमान अवशोषण है।
  • निकट UV पार्श्व श्रृंखलाओं के अभिविन्यास और परिवेश पर निर्भर करता है।
  • किसी प्रोटीन का सुदूर UV CD स्पेक्ट्रम, प्रोटीन आधार की असममित विशेषताओं के बारे में जानकारी प्रदान करता है।
  • द्वितीयक संरचनाओं के प्रकार और मात्रा के बारे में जानकारी दूर-यूवी सीडी द्वारा प्रदान की जाती है।
  • तृतीयक संरचनाएं ट्रिप्टोफैन उत्सर्जन और निकट-यूवी स्पेक्ट्रा द्वारा प्रकट होती हैं।

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Important Points

विकल्प 1 - सही

  • हरी रेखा (pH 3 पर) काली रेखा (pH 7 पर प्रोटीन) से स्पष्ट रूप से भिन्न है, जैसा कि निकट-यूवी सीडी और उत्सर्जन स्पेक्ट्रा में दिखाया गया है, जो बताता है कि पीएच 3 पर तृतीयक संरचना में बदलाव आया होगा।
  • पिघली हुई गोलाकार अवस्था में, द्वितीयक संरचना की मात्रा बदल सकती है। ट्रिप्टोफैन अवशेषों को विकृतीकरण उपचार के परिणामस्वरूप और अधिक उजागर किया गया होगा, जैसा कि लाल रेखा (6.0 एम गुआनिडीन हाइड्रोक्लोराइड वाला प्रोटीन, जो विकृतीकरण के रूप में कार्य करता है) द्वारा दिखाया गया है, जो कि दूर-यूवी सीडी स्पेक्ट्रा से भी पुष्टि करता है, जहां लाल रेखा सपाट है, जो द्वितीयक संरचनाओं के साथ-साथ तृतीयक संरचनाओं के भी पूर्ण नुकसान का संकेत देती है।

विकल्प 2 - गलत

  • सुदूर UV-CD स्पेक्ट्रा में द्वितीयक संरचना का प्रकार और मात्रा अपरिवर्तित रहती है, तथा पिघली हुई ग्लोब्यूल अवस्था में यह अभी भी संभव है।

विकल्प 3 - गलत

  • चूंकि प्रोटीन के अत्यधिक विकृत रूपों में मूल रूप से वलित हुए प्रोटीन (4.75N0.29A बनाम 2.21N0.57) की तुलना में छोटी हाइड्रोडायनामिक त्रिज्या (Rh) होती है, इसलिए विकृतीकरण के साथ Rh घटता नहीं बल्कि बढ़ता है (जिसका प्रमाण प्रतिदीप्ति और निकट-UV CD स्पेक्ट्रा में परिवर्तन से मिलता है)।

विकल्प 4 - गलत

  • pH3 पर द्वितीयक संरचनाएं विघटित नहीं होतीं, अर्थात् विकृतीकरण न्यूनतम होता है।

निष्कर्ष:-

इसलिए, प्रयोग रिपोर्ट करता है कि pH 7.0 पर प्रोटीन पूर्णतया वलित है, pH 3.0 पर अम्ल प्रेंरित द्रवित गोलिका तथा 6 M गुआनिडिन हाइड्रोक्लो राइड में अवलित है। 

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