निम्न प्रदान किए गये सारणी के कालम X तथा Y मानव लसीका कोशिका के संवर्धन तथा मानव गुणसूत्रों के बेंन्डिंग/ कैरियोटाइप से सम्बन्धित कुछ प्रशोधन प्रणालियां, अभिकर्मक तथा घटनाओं / प्रक्रियाओं की सूची प्रदान करता है।

कालम X		कालम Y
A.	50°C पर 5% बेरियम हाइड्रोक्साइड से प्रशोधन	I.	R-बैंन्डिंग
B.	ट्रिप्सिन से प्रशोधन	II.	C-बैंन्डिंग
C.	फाइटोहीमैग्लूटैनिन	III.	समसूत्री प्रेरण
D.	80°C पर फास्फेट बफर से प्रशोधन	IV.	केन्द्रिक संघटक प्रक्षेत्र
E.	रजत अभिरंजन	v.	G-बैंन्डिंग

निम्नांकित कौन सा एक विकल्प कालम X तथा कालम Y के बीच के सभी सही मेलों को दर्शाता है?

सही उत्तर विकल्प 1 है अर्थात A - ii; B - v; C - iii; D - i; E - iv

Key Points

• गुणसूत्र बैंडिंग से तात्पर्य कोशिका विभाजन से गुजरने वाली कोशिका के गुणसूत्रों की संख्या और संरचना के अध्ययन से है, जिसमें विभाजित कोशिका को कुछ रंगों से रंगा जाता है और साइटोजेनेटिक विश्लेषण के लिए माइक्रोस्कोप के नीचे इसकी जांच की जाती है।
• जब विभाजित कोशिका को डाई से उपचारित किया जाता है, तो स्पिंडल फाइबर गायब हो जाते हैं और कोशिका विभाजन रुक जाता है।
• इस तकनीक को बैंडिंग तकनीक के नाम से जाना जाता है क्योंकि इस प्रक्रिया में गुणसूत्रों की लंबाई के अनुरूप बैंड के पैटर्न बनाये जाते हैं।

बैंडिंग तकनीक के प्रकार -

1. Q-बैंडिंग :
   • इस तकनीक में प्रयुक्त किया जाने वाला स्टेन क्विनैक्राइन स्टेन (क्विनैक्राइन डाइहाइड्रोक्लोराइड या क्विनैक्राइन मस्टर्ड) है।
   • यह पहली खोजी गई बैंडिंग तकनीक है और यह सबसे सरल तकनीक है।
   • क्विनैक्राइन डीएनए-इंटरकेलेटिंग एजेंट है और यह एक प्रतिदीप्ति यौगिक भी है, यह गहरे रंग की पृष्ठभूमि पर चमकीले बैंड के पैटर्न में गुणसूत्रों को रंग देता है।
   • चूंकि यह एक प्रतिदीप्ति अभिरंजन है, इसलिए गुणसूत्रों की बैंडिंग को देखने के लिए UV प्रकाश का प्रयोग किया जाता है।
   • क्विनैक्राइन में A:T समृद्ध क्षेत्र के लिए अधिक आकर्षण होता है, इसलिए, A:T समृद्ध क्षेत्र गुणसूत्रों के G:C समृद्ध क्षेत्रों की तुलना में अधिक चमकीला दिखाई देता है। इसलिए A:T समृद्ध क्षेत्र अधिक चमकीला दिखाई देता है।
2. G बैंडिंग :
   • यह सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक है
   • गिएम्सा तकनीक गैर-प्रतिदीप्ति अभिरंजन तकनीक है
   • अभिरंजन से पहले गुणसूत्रों को प्रोटीयोलाइटिक एंजाइम अर्थात ट्रिप्सिन से पूर्व उपचारित किया जाता है, इसलिए इस उपचार को जीटीजी बैंडिंग (ट्रिप्सिन गिएम्सा द्वारा जी-बैंडिंग) भी कहा जाता है।
   • इसने Q-बैंडिंग के समान बैंडिंग पैटर्न का उत्पादन किया, क्योंकि गिएम्सा स्टेन में A:T समृद्ध अनुक्रमों के लिए अधिक आकर्षण होता है।
   • इसलिए, A:T से समृद्ध क्षेत्र गहरे बैंड बनाता है, जबकि G:C से समृद्ध क्षेत्र हल्के बैंड बनाता है।
3. C बैंडिंग :
   • यह एक सेंट्रोमेरिक हेटरोक्रोमैटिन अभिरंजन तकनीक है और यह संरचनात्मक हेटरोक्रोमैटिन को अभिरंजित करती है।
   • इसमें गिएम्सा स्टेन्स का भी उपयोग किया जाता है, लेकिन यहां पूर्व-उपचार अलग है।
   • पूर्व उपचार में 50°C पर हल्के क्षार बेरियम हाइड्रॉक्साइड 5% Ba(OH) ₂ शामिल था। 
   • गुणसूत्रों/विभाजित कोशिकाओं को गिएम्सा अभिरंजन से अभिरंजित करने से पहले हल्के क्षार से पूर्व-उपचारित किया जाता है, इसलिए, इस तकनीक को सीबीजी-अभिरंजन भी कहा जाता है।
   • इस तकनीक का उपयोग अत्यधिक दोहराव वाले डीएनए को अभिरंजित करने के लिए किया जाता है, जो Y गुणसूत्र के सेंट्रोमियर और दूरस्थ भागों में मौजूद होता है।
4. R बैंडिंग :
   • R-बैंडिंग का तात्पर्य रिवर्स क्रोमोसोम बैंडिंग से है।
   • यह बैंडिंग पैटर्न G-बैंडिंग और Q-बैंडिंग के विपरीत है।
   • इस अभिरंजन तकनीक में, गिएम्सा अभिरंजन का उपयोग किया जाता है, लेकिन अभिरंजन से पहले, विभाजित कोशिकाओं को फॉस्फेट बफर घोल में 88°C पर गर्म किया जाता है, जिससे इन A:T समृद्ध क्षेत्रों में DNA पृथक्करण होता है।
   • चूँकि, A:T में दो हाइड्रोजन बंध होते हैं जबकि G:C बंध में तीन हाइड्रोजन बंध होते हैं, इसलिए, A:T बंध तेजी से विकृत होते हैं।
   • इसके बाद G:C समृद्ध क्षेत्रों को गिएम्सा अभिरंजन द्वारा अभिरंजित किया जाता है, जो गहरे रंग का अभिरंजित दिखाई देता है।

व्याख्या:

• C बैंडिंग में, गिएम्सा अभिरंजन से पहले 50°C पर बेरियम हाइड्रॉक्साइड 5% Ba(OH)₂ का हल्का क्षारीय उपचार किया जाता है।
• G बैंडिंग में, गिएम्सा स्टेन से रंगने से पहले प्रोटीयोलाइटिक एंजाइम ट्रिप्सिन से पूर्व उपचार किया जाता है।
• फाइटोहेमाग्लगुटिनिन (PHA) एक माइटोजन है जिसका व्यापक रूप से मानव लिम्फोसाइटों के लिए माइटोटिक उत्तेजक के रूप में उपयोग किया जाता है।
• R बैंडिंग में, विभाजित कोशिकाओं को गिएम्सा अभिरंजन से पूर्व फॉस्फेट बफर विलयन में 88°C पर गर्म किया जाता है।
• न्यूक्लियोलर ऑर्गनाइजर क्षेत्र (NOR) क्रोमोसोमल लूप या प्रोटीन और डीएनए को संदर्भित करता है जो राइबोसोम के संश्लेषण में शामिल होते हैं। इसे सिल्वर स्टेनिंग तकनीक द्वारा पहचाना जा सकता है, जहाँ NOR को नाभिक में काले बिंदुओं के रूप में पहचाना जा सकता है।

संशोधित तालिका:

Additional Information

• फाइटोहेमाग्लगुटिनिन (PHA) पौधों, विशेष रूप से फलियों में मौजूद लेक्टिन है। यह t-कोशिकाओं की झिल्ली से जुड़ने और चयापचय गतिविधि को उत्तेजित करने के लिए जाना जाता है। जैसा कि नाम से पता चलता है, यह प्रोटीन रक्त कोशिकाओं को एक साथ इकट्ठा करने का कारण बनता है।